MycoTrack

Mykoplazmata jsou bakterie bez buněčné stěny. Jsou považována za nejmenší organismy schopné samostatné replikace. Mykoplazmata vyvolávají řadu akutních onemocnění, např. pneumonii, bronchitidu a další. Ve výzkumných laboratořích jsou častým zdrojem kontaminace buněčných kultur, která má mnoho dopadů na buněčný metabolismus. Předpokládá se, že mykoplazmata mohou např. měnit úroveň syntézy RNA, DNA a proteinů, vyvolávat chromozomové aberace, měnit buněčnou morfologii a inhibovat růst buněk. V současnosti je k detekci mykoplazmat k dispozici několik metod. Jsou založeny např. na růstu kolonií mykoplazmat na agaru, histochemickém značení, elektronové mikroskopii, značení pomocí barviv DNA, jako je Hoechst 33258 nebo DAPI, testech ELISA, značení pomocí protilátek, hybridizaci, detekci pomocí PCR, enzymatických testech nebo analýze proteinů. Každá z uvedených metod má své výhody i nevýhody, např. nutnost subjektivního hodnocení nebo materiální, přístrojovou či časovou náročnost. Pro spolehlivé posouzení možné kontaminace buněčných kultur jsou proto zapotřebí alespoň dva nezávislé přístupy.

MycoTrack je technologie umožňující mikroskopickou detekci mykoplazmových infekcí. Je založena na syntéze krátkých řetězců DNA uvnitř fixovaných a permeabilizovaných mykoplazmat prostřednictvím enzymatické inkorporace značených nukleotidů. Inkorporované nukleotidy se následně detekují a vzorky se vyhodnocují fluorescenční mikroskopií.

►Univerzálnost: nezávislost na kmeni mykoplazmat
►Specifičnost: metoda nedetekuje bakteriální buňky s buněčnou stěnou
►Rychlost: 2 hodiny od fixace po analýzu buněk
►Přímá vizualizace DNA mykoplazmat
►Není nutná lyze buněk
►Nejcitlivější z mikroskopických technik
►Není nutný další vývoj

CZ 307304